国产精品久免费的黄网站,人人澡人人澡人人妻人人四虎,久久久久久久九九九九,精品成人乱色一区二区

當(dāng)前位置:主頁 > 技術(shù)文章 > 四種細(xì)胞破碎的方法

四種細(xì)胞破碎的方法

更新時(shí)間:2019-10-10 點(diǎn)擊次數(shù):15987

一、機(jī)械破碎法:是指利用搗碎機(jī)、研磨器或勻漿器 等將細(xì)胞破碎開來 。


1. 高速組織搗碎:將材料配成稀糊狀液,放置于筒內(nèi)約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調(diào)速器先撥至慢處,開動(dòng)開關(guān)后,逐步加速至所需速度。此法適用于動(dòng)物內(nèi)臟組織、植物肉質(zhì)種子等。


2. 玻璃勻漿器勻漿:先將剪碎的組織置于管中,再套入研桿來回研磨,上下移動(dòng),即可將細(xì)胞研碎,此法細(xì)胞破碎程度比高速組織搗碎機(jī)為高,適用于量少和動(dòng)物臟器組織。


二、物理破碎法:指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細(xì)胞破碎開來。


1.用一定功率的超聲波處理細(xì)胞懸液,使細(xì)胞急劇震蕩破裂(借助超聲的震動(dòng)力破碎細(xì)胞壁和細(xì)胞器)。
機(jī)制:可能與強(qiáng)聲波作用溶液時(shí),氣泡產(chǎn)生、長大和破碎的空化現(xiàn)象有關(guān),空化現(xiàn)象引起的沖擊波和剪刀力使細(xì)胞裂解。
超聲波破碎的效率取決于聲頻、聲能、處理時(shí)間、細(xì)胞濃度和細(xì)胞類型等。(使用時(shí)注意降溫,防止過熱)。


2. 高壓破碎:細(xì)胞懸浮液從高壓室的環(huán)狀隙噴射到靜止的撞擊環(huán)上,被迫改變方向經(jīng)出口管流出。此過程中細(xì)胞經(jīng)歷了高速造成的剪切的碰撞及高壓到常壓的變化,從而破碎釋放內(nèi)含物。
這是一種溫和的、*破碎細(xì)胞的較理想的方法。


3. 反復(fù)凍融法:將細(xì)胞在-20度以下冰凍,室溫融解,反復(fù)幾次,由于細(xì)胞內(nèi)冰粒形成和剩余細(xì)胞液的鹽濃度增高引起溶脹,使細(xì)胞結(jié)構(gòu)破碎。


三、化學(xué)破碎法:指利用甲醛、丙酮等有機(jī)溶劑或表面活性劑作用于細(xì)胞膜,使細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)遭到破壞或透性發(fā)生改變 。


有些動(dòng)物細(xì)胞,例如腫瘤細(xì)胞可采用十二烷基磺酸鈉(SDS)、去氧膽酸鈉等細(xì)胞膜破壞。濃度一般為1mg/ml。


四、酶學(xué)破碎法 :選用合適的酶,使細(xì)胞壁遭到破壞,進(jìn)而在低滲溶液中將原生質(zhì)體破碎開來。
細(xì)菌細(xì)胞壁較厚,可采用溶菌酶處理效果更好。
裂解液標(biāo)準(zhǔn)配方: :50mM Tris-HCl(pH8.5~9.0), 2mM EDTA, 100mM NaCl, 0.5% Triton X-100, 1mg/ml溶菌酶。(溶菌酶在這個(gè)pH范圍內(nèi)比較好發(fā)揮作用) 。


綜合敘述:無論用哪一種方法破碎組織細(xì)胞,都會(huì)使細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)或核酸水解酶釋放到溶液中,使大分子生物降解,導(dǎo)致天然物質(zhì)量的減少,加入二異丙基氟磷酸(DFP)可以抑制或減慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入PMSF也能清除蛋白水解酶活力,但不是全部,而且應(yīng)該在破碎的同時(shí)多加幾次;另外,還可通過選擇pH、溫度或離子強(qiáng)度等,使這些條件都要適合于目的物質(zhì)的提取。

掃一掃,加微信

版權(quán)所有 © 2025北京來亨科學(xué)儀器有限公司
備案號:京ICP備2024080360號-1 技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng) 管理登陸 sitemap.xml

黑人亨特玩人妻杨晓蓉| 亚洲 日韩 激情 无码 中出| 色婷婷亚洲婷婷七月中文字幕| 成人爽a毛片一区二区免费| 50岁熟妇大白屁股真爽| 天码人妻一区二区三区| 亚洲男人第一无码av网| 久久人妻AV中文字幕| 久久国产加勒比精品无码| 精品久久人人爽天天玩人人妻| 第一次处破女18分钟高清| 国产乱人伦精品一区二区在线观看 | 网址你懂得| 性情网| 激情内射亚洲一区二区三区爱妻| 国产69精品久久久久久| 99精品产国品一二三产区| 搡老女人老91妇女老熟女oo | 麻豆天美国产一区在线播放| 蜜臀久久99精品久久久久久小说| 无码一区二区波多野结衣播放搜索 | 少妇精品久久久久久久久久| 青青伊人| 久久狠狠亚洲综合| 成人99| 91丨九色丨国产熟女1| 日韩a级视频| 女人18片毛片60分钟翻译| 欧美交| 国产精品激情| 成人高潮1000部啪啪| 奇米网777| 方正县| 久久久综合亚洲色一区二区三区| 狠狠色丁香婷婷久久综合| 国产啪精品视频网站免| 人妻少妇看A偷人无码| 亚洲日本一区二区一本一道| jizzyou中国少妇| 又爽又黄又无遮挡网站| 开心久久婷婷综合中文字幕|